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P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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描述：測(cè)定意義蛋白質(zhì)羰基是多種氨基酸在蛋白質(zhì)的氧化修飾過程中的早期標(biāo)志，其含量高低表明蛋白質(zhì)氧化損傷程度的大小，是衡量蛋白質(zhì)氧化損傷的主要指標(biāo)。測(cè)定原理羰基與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成紅色2,4-二硝基苯腙，在370nm處有特征吸收峰。蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)：廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時(shí)間：2019-11-07訪問量：553標(biāo)題：蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、漩渦震蕩儀、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水，無水乙醇，乙酸乙酯。
試劑組成和配制
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根據(jù)樣品數(shù)，每支加1mL水溶解，每支為10個(gè)樣品用量）
試劑二：液體20mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：根據(jù)測(cè)定樣品量，將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。
試劑六：液體100mL×1瓶，4℃保存。
樣品處理
組織樣品：稱取約0.1g組織樣品，加入1mL提取液，充分勻漿后于4℃，5000rpm離心10min，取上清，加入0.1mL試劑一，室溫放置10min，4℃，12000rpm離心10min，取上清，然后取20μL測(cè)定蛋白含量，剩余的作為待測(cè)樣品。
測(cè)定步驟和操作表
| 空白管 | 測(cè)定管 |
樣品（mL） | 0.2 | 0.2 |
試劑二（mL） |
| 0.4 |
試劑三（mL） | 0.4 |
|
混勻，37℃避光反應(yīng)1h | ||
試劑四（mL） | 0.5 | 0.5 |
靜置5min，4℃，12000rpm離心15min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，4℃，12000rpm離心10min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，4℃，12000rpm離心10min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，4℃，12000rpm離心10min，棄上清，留沉淀 | ||
試劑六（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩渦混勻，37℃溫育15min，沉淀全部溶解后，4℃，12000rpm離心15min，取上清，1mL石英比色皿，試劑六調(diào)零，測(cè)定OD370 | ||
計(jì)算公式
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/mg prot）= 227.27×（OD370測(cè)定管－OD370測(cè)定管）÷樣品蛋白質(zhì)濃度注意事項(xiàng)：
1. 試劑一使用之前根據(jù)要測(cè)定的樣品數(shù)現(xiàn)配，配置好后4℃保存，若變?yōu)楹谏瑒t不能使用。
2. 試劑二見光易分解，反應(yīng)需嚴(yán)格避光。
蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒
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